六角定赖（1495年－1552年1月21日），六角高赖次子，日本战国时代南近江的守护大名，官至从四位下弹正忠，谥号江云，法名云光寺殿光室亀公大居士。
六角定赖于永正元年（1504年）在京都相国寺出家为僧，称吉侍者。由于其兄六角氏纲在永正15年（1518年）在与细川家的战争中被讨死，定赖被迫还俗继承家业，六角定赖是六角家的一代英主，率军降伏了浅井家(浅井久政)，成为南近江国霸主，并修建了观音寺城。
在内政上，率先推出“城割”的命令，要家臣们各自毁掉原有的居城，全部集中于观音寺城，以方便管理。这道“城割”命令，被认为是后来出现的一国一城令的雏形。 同时也是第一位实施乐市的大名，使观音寺城的城下町成为众商云集的商业都市。 在外交上，以足利将军支持者的身份，介入当时室町幕府的中央政治。也以政治联姻的方式，让自己的子女跟各邻国大名联姻。 在定赖的这段领导期间，六角家达到了最全盛的时刻。
1552年逝世后，其子六角义贤...
