在角色行当上，徽剧全面继承了“徽池雅调”的角色行当体制，同时又吸收了昆曲、弋阳腔的分行特点，并受到目连戏的深刻影响。其角色在清乾隆以前分为末、生、小生、外、旦、贴、夫、净、丑九行，徽班艺人称之为“九顶网巾唱闹台”。乾隆以后。徽剧在徽商经济的支持下进入全盛时期，角色行当又有所发展，分为正生、老生、小生、大花、小花、二花、四花、正旦、花旦、作旦、武旦、老旦等行。这时期由于班社演员众多，又在打行里分出一些小行，如红生、武老生、武小生、武二花、武丑等，原有的末行改设在杂行。嘉庆时期，随着徽剧中历史和战争题材剧目的增多，角色行当又进一步细分为老生、老外、副末、小生、武生、武老生、正旦、花旦、作旦、武小旦、三梁旦、大花脸、二花脸、三花脸、四花脸、杂行，共十七行。道光、咸丰以后，北京的徽剧逐渐演变成京剧，南方的徽剧班社也随着徽商经济的衰落而缩小，庞大的班社大部分划分为三、五十人的小戏班，角色行当也随之做了相应归并，逐渐固定为近代的十大行当，即正生、老生（文武）、小生（文武）、大花、二花、三花（丑）、正旦、花旦、老旦、武旦。末行归老生行，外设杂行，专门扮演宫女、院子、中军等龙套角色和老虎、狗形之类及武打，兼管道具箱等杂务。角色行当表面上少了，但对演员的要求更高了。每行演员在掌握本行演技之外，还要兼学其他一行或几行，尽量做到技艺全、戏路宽，唱念做打具佳，文武昆乱不挡。

 正生：又称须生，多扮演中年男子，表演以唱工为主，同时也有做、念功夫。如《水淹七军》中的关羽、《八阵图》中的诸葛亮等。

 老生：分文武老生，多扮演中、老年男子，表演要求唱、念、做、舞并重，还须具备扎实的武功基础和靠把功夫。文戏所扮角色如《举鼎观画》、《跑城》中的徐策，《追韩信》的萧何；武戏角色如《三挡》中的秦琼，《定军山》中的黄忠等。

 小生：分文武，多扮演青、少年男子，唱念要求真假声结合，唱腔刚劲秀美；身段动作讲求儒雅潇洒、风流倜傥，并掌握一定的翎子功、把子功及翻滚跌扑等武功技巧。文戏所扮角色如《银桃山》中的周珠明、《凤凰山》的海俊、《打金枝》的郭暧等；武戏角色如《临江会》的周瑜、《白门楼》的吕布、《红桃山》的花荣等。

 大花：又称净，分白脸、黑脸、花脸、红脸。表演上以唱为主，要求声音洪亮、有炸音；做工讲究雄浑凝重、气宇轩昂。所扮角色黑脸如《铡包勉》的包拯、《玉灵符》的项羽等；白脸戏如《打严嵩》的严嵩、《二进宫》的徐延昭等；花脸戏如《打龙篷》的郑子明、《定军山》的夏侯渊等；红脸戏如《古城会》的关羽、《太平桥》的李克用等。

 二花：即副净，重做工，念白铿锵有力，扑打火爆炽烈，还会一些特技表演。所扮角色如《收张奎》的张奎、《醉打山门》的鲁智深等。

 三花：即丑行，分文武。多扮演性格诙谐、幽默的角色，兼演丑旦，表演上讲求唱念做打俱全。文戏所扮角色如《九锡宫》的程咬金、《借靴》的刘二等；武戏角色如《九龙杯》的杨香武、《花蝴蝶》的蒋平等。丑旦角色如《骂鸡》的王婆、《巧姻缘》的奶娘等。

 正旦：又称青衣，主要扮演稳重端庄的中、青年妇女，重唱工，唱腔讲究珠圆玉润、委婉细腻，善于表达人物情感；身段动作要求朴素、庄重。所扮角色如《处猎》的李三娘、《双别窑》的王宝钏等。

 花旦：多扮演天真活泼、妩媚明快的年轻女子，重做工，表演讲求细腻秀美，动作，动作要求美、媚、脆。所扮角色如《戏牡丹》的白牡丹、《杀嫂》的潘金莲等。

 武旦：多扮演英勇善战的女将、女侠、女仙、女妖等。重武打和翻扑，讲求身手矫健；唱念和做工讲究在妩媚中显出刚劲、挺拔的气质。所扮角色如《破洪州》中的穆桂英、《十字坡》的孙二娘等。

 老旦：多扮演各种不同身份的老年妇女。重唱念功夫，表演上讲究神态、步伐稳重。所扮角色如《四郎探母》的佘太君、《牧羊卷》的春登母。

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