蒲生定秀（永正五年1508年—天正七年1579年4月22日）日本战国时代武将，近江国日野城城主。通称藤十郎，官职下野守、左兵卫大夫。父亲是蒲生高乡，妻子是马渊山城守的女儿。儿子为蒲生贤秀、青地茂纲和小仓实隆。
永正五年（1508年）蒲生定秀出生。之后和父亲蒲生高乡一同仕任南近江的六角氏，而蒲生高乡则把蒲生氏分为两家，本家家督由定秀的兄弟蒲生秀纪继承。高乡和定秀两父子得到六角定赖的信任，后来定秀和六角氏重臣马渊氏的女儿结婚，蒲生氏在六角氏得到稳固的地位。
大永二年（1522年）音羽城的蒲生秀纪遭遇攻击，大永三年（1523年）3月到8月的笼城战秀纪被降服，后来在六角定赖的仲裁下秀纪和定秀的蒲生家家督争让事件也从和睦下结束。大永五年（1525年）秀纪在镰挂城被谋杀（其他说法是毒杀）。不久后，蒲生氏的居城就在天文年间从音羽城转去中野城。
定秀成为定赖的家臣期间，享禄三年（1530年）的京都出战和享禄四年（1531年）的浅井...
