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定点突变

定点突变(Site-directed mutagenesis),经由设计好的寡核苷酸,在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变,也就是说,这种突变是预先设定好的,所以也有人将它称为“反遗传法”。定点突变由加拿大生化学家迈克尔·史密斯发明,他与PCR发明者凯利·穆利斯在1993年共同获得诺贝尔化学奖。

根据生物学,基因会发生突变,突变可以自发也可以诱发。在定点突变法之前,突变株的产生必须经由自然界或用化学等方法让基因突变,这属于随机突变。而突变株必须在生物体上有所改变,才能确定有突变发生。突变位置必须利用分生或化学方法来确定。而定点突变法可经由设计好的寡核苷酸,在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变,也就是说,这种突变是预先设定好的。

定点突变简介资料
1.以有配对错误的单股DNA分子作为引物,此引物包含想要突变的核苷酸,与载体进行退火后,转化导入细胞内。 2.DNA双股使用DNA 聚合酶来延长,宿主会产生两种质体,进行克隆转译后即得到突变一个氨基酸的蛋白质
定点突变的基本流程需要合成一个短的 DNA 引物。其包含了目标突变,并且与突变位点附近的模板 DNA 互补以与目的基因的 DNA 杂交。突变可以是一个碱基的改变(点突变),多个碱基的改变,增加或者删除。这个引物接着被一个 DNA 聚合酶延展,拷贝剩下的基因。拷贝后的基因包含了突变位点,并以载体的形式引入宿主细胞,并被克隆。最后,突变将通过 DNA 测序以确保包含了目标突变
经由设计好的寡核苷酸,在任何一个基因片段上进行随意或设计好的突变
定点突变相关文献
突变
突变的种类以功能分类以突变对于基因表现之影响来作分类的话,可分为下列几种:失去功能的突变失去功能的突变是指基因受到影响,让基因表现不明显,或使基因的产物蛋白质失去功能。次形态突变此种突变会使基因的表现或是基因产物的活性减弱,但不会消失。超形态突变此种突变与次形态突变相反,会使基因的表现加强。例如波大多人。获得功能的突变获得功能的突变是指发生的突变让原本应该是不表现的基因产生活性,进而影响细胞功能,这样的突变多半需要染色体程度的突变较有可能产生,而最常发生获得功能的突变就是癌细胞。以突变机理分类点突变DNA序列中涉及单个核苷酸或碱基的变化称为点突变。通常有两种情况:一是一种碱基或核苷酸被另一种碱基或核苷酸所替换;二是一个碱基的插入或缺失。沉默突变当点突变发生在基因及其调控序列之外,或使基因序列内一种密码子变成编码同一种氨基酸的另一种同义密码子时,不会改变生物个体的基因产物,因而不引起性状变异...
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定点突变
基本原理定点突变的基本流程需要合成一个短的DNA引物。其包含了目标突变,并且与突变位点附近的模板DNA互补以与目的基因的DNA杂交。突变可以是一个碱基的改变(点突变),多个碱基的改变,增加或者删除。这个引物接着被一个DNA聚合酶延展,拷贝剩下的基因。拷贝后的基因包含了突变位点,并以载体的形式引入宿主细胞,并被克隆。最后,突变将通过DNA测序以确保包含了目标突变。原始的单引物延展法很低效,突变产量低。产物包含了原有的非突变模板以及突变链,突变及非突变后代混合在一起。此外,模板DNA经过甲基化,而突变链未经甲基化,由于偏爱甲基化模板DNA的错配修复系统的存在,导致突变数目进一步下降。因此,人们开发了许多新方法来提高突变效率。方法1.以有配对错误的单股DNA分子作为引物,此引物包含想要突变的核苷酸,与载体进行退火后,转化导入细胞内。2.DNA双股使用DNA聚合酶来延长,宿主会产生两种质体,进行克...
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点突变
点突变分类点突变可依发生位置对基因功能的影响而作以下分类:转换/颠换的分类转换(Alpha)和颠换(Beta)。在1959年恩斯特·弗里斯(ErnstFreese)创造了术语“转换”或“颠换”对不同类型的点突变进行分类。转换:嘌呤替换另一个嘌呤,或嘧啶替换另一个嘧啶.颠换:嘌呤替换嘧啶,或反之亦然。转换(Alpha)和颠换(Beta)在突变速率有系统的差异。转换突变大于颠换突变约10倍以上。功能的分类无义突变(英语:nonsensemutation)(nonsensemutation):使原本可制造蛋白质的密码变成停止密码。错义突变(missensemutation):使密码所对应的氨基酸改变。无表型突变(英语:silentmutation)(silentmutation):密码改变,但对应的氨基酸不变。
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定点球
参见
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风云突变
风云突变风云突变风云突变的意思风云突变是什么意思风云突变什么意思风云突变的近义词风云突变的反义词风云突变的拼音【成语意思】:风云突然发生了变化。比喻局势突然发生了巨大变化。【用法分析】:风云突变主谓式;作谓语、宾语、状语;指政局等。【成语来源】:毛泽东《清平乐蒋桂战争》词:“风云突变,军阀重开战。洒向人间都是怨,一枕黄粱再现。”【褒贬解析】:中性成语【成语结构】:主谓式成语【使用程度】:常用成语【成语年代】:当代成语【成语字数】:四字成语【成语拼音】:fēngyúntūbiàn【英语翻译】:thereisasuddenchangeinthesituation【成语声母】:FYTB【风云突变的近义词】:风云变幻、风云万变【风云突变的反义词】:一成不变【近似成语】:变幻无穷:变幻多种多样,没有穷尽变幻无常:变幻:不规则的变化;常:常规。事物经常变化;没有一定规律。又作“变化无常”。变故易常:改...
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